目的：分析单份非亲缘脐血造血干细胞移植(sUCBT)的预后影响因素及脐血深低温冻时间长短 与细胞活力、移植预后的相关性。
造血干细胞移植 (HscT)是多种恶性血液病、骨髓衰竭性疾病、实体肿瘤、遗传代谢性疾病最有效的治疗手段之一。由于脐血来源丰富、采集过程无伤害、HLA配型要求相对较低、免疫原性弱、发生移植物抗宿主病 (GVHD)的风险低等优点，脐血造血干细胞移植 (UCBT)已被广泛应用于临床，移植效果接近于骨髓移植。对于缺乏HLA全相合骨髓/外周血供体的患者，UCBT是较好的治疗选择。
一
一、病例
2007年3月15日至2013年l2月26日使用上海脐血库提供的脐血进行sUSCT的来自国内28家医院的137例患者 ，其中2007—2011年移植78例，2011 以后移植 59例。男性 84例 ，女性53例 ，中位年龄 6(1—47)岁。患者原发病以白血病为主(94例)，还包括骨髓增生异常综合征9例，先天性疾病19例，实体瘤7例，其他疾病9例(6.6%).
二、移植基本特征
137例sUCBT的患者中，供受体性别相合59例，血型相合58例，供受体HLA配型 (A、B、DRB1位点血清学配型 )6/6相合47例，5/6相合68例，4/6相合22例。根据原发病类型、患者临床状况、移植医院的不同，移植预处理方案及 GVHD预防方案的个体化差异较大，65．0%的患者采用白消安(Bu)为主的预处理方案，21.1%的患者采用全身照射(TBI)为主的预处理。
三 、脐血情况
137份脐血平均冻存时间(从脐血采集日期到临床移植日期)为698(96～1968)d，冻存时间在1年以内的脐血有36份 (26．3%)，冻存1～2年的有47份(34．3%)，2～3年的有31份(22.6%)，冻存3年以上的有23份(16.8%)。脐血采集后制备过程中，细胞回收率平均为82.9%(40.0%～95.6%)，复苏后细胞活力(活细胞比例)平均为87．4%(67.0%～99.0%)。患者输入的有核细胞数为(8.13士4.95)×10/kg，CD34细胞数为(2.66-4-2.78)×10/kg。
四、定义和标准
1．移植后造血重建：外周血中性粒细胞计数连续3d≥0.5×l0/L为粒系造血重建；在未输注血小板的情况下，连续3d外周血PLT≥20×109/L为血小板重建；粒系重建后采用染色体原位杂交(FISH)或短串联重复序列．聚合酶链反应(STR—PCR)检测供受者嵌合体。
2．植入失败：指移植后60d内未重建造血，或供受嵌合体检测不到供体成分。
3．急性GVHD的诊断和分级：参照文献[1]标准进行GVHD的诊断和分级。
4．细胞回收率：是脐血复苏后与液氮冻存前有核细胞比例。
5．细胞活力：深低温冻存的脐血经复苏后，经锥虫蓝染色测得的活细胞比例。
五、结 果
1．SUCBT的植入及造血重建情况：0～2年组19例患者发生植入失败，2年以上组12例患者发生植入失败，差异无统计学意义 (P=0．927)。0—2年组中性粒细胞重建的中位时问为16(9～37)d，血小板重建的中位时间3O(1O～94)d；2年以上组 的中性粒 细胞重建中位时间14(7～40)d，血小板重建中位时 间为 33(17～79)d，差异均无统计学意义(P=0.203，P=0.310)。
2．急性GVHD及治疗相关死亡(TRM)：两组患者急性GVHD发生率分别为51.6%和 61.9%(Jp= 0.574)，TRM率分别为43.4%和 29.6%(JD=0.124)。对植入失败、TRM 进行多因素分析，相关因素分别为HLA配型、预处理方案、输注细胞数、年龄、 原发病、移植年份(2011年及以前/2011年以后)、脐血冻存时间。年龄、移植年份是治疗相关死亡的2个危险因素，TRM在年龄越大的患者中发生率越高
(RR=2.830，95%CI1.127～7.104，P=0.027)，2011年以后移植的患者比以前的 TRM率较低(RR=O.203，95％C10.088～0.468，P<0.001)。其他因素未发现差异有统计学意义。
3．UCBT后生存情况：移植后死亡52例，失访11例，中位随访时间为799(215～2656)d。死于严重感染25例、复发8例、重度GVHD6例、出血5例、多器官功能衰竭2例，6例患者死亡原因不详。移植的脐血保存时间在0～2年和2年以上的两组患者，5年生存率分别为55.6％和 698％(P=0.124)(图 A)；20l1年及 以前移植的患者OS率为48.7％，2011年以后移植的患者OS率为79.6％，两组 OS率差异有统计学意义(Jp=0．001)(图 B)。
六、讨 论
1989年报道了世界上首例USCT，短短20余年，全球已开展2000余例UCBT。UCBT治疗的疾病谱越来越广。本研究137例sUCBT患者，所涉及的原发病种类包括白血病、骨髓衰竭性疾病、实体肿瘤、遗传性疾病(免疫缺陷、代谢性疾病、地中海贫血、范可尼贫血)等。本组病例以儿童为主，0～16岁患者为 113例 (82．5％)。多因素分析提示 UCBT在儿童患者中预后较好，年龄越大，TRM率越高(RR=2．830，P= 0．027)。欧洲脐血库2014年亦进行大样本sUCBT 的报道，也提示年龄增大是与死亡相关的高危因素之一 。柳叶刀杂志在2007年报道了国际血液和骨髓 移植研究中心(CIBMTR)的一项对照研究结果，儿童 sUCBT的疗效与骨髓移植相当。国内临床移植专家提出，对于缺乏HLA相合骨髓供体的患者，UCBT也是较好的可供选择的移植方案。除年龄以外，本研究中与TRM有关的另一个危险因素是移植的年份。2011年以后移植的患者，5 年OS率达79.6％，与2007至2011年移植患者 OS率 (48.7％)相比有显著提高。一项来自韩国13个移植中心的报道，1996至2006年进行 UCBT的 236例儿童患者5年OS率为47.5％。孙自敏等报道的40例UCBT治疗恶性血液病2年OS率为58．8％。近年来UCBT预后显著改善，主要原因是HLA高分辨配型的普及优化了脐血的选择，新药的应用及临床预处理、支持治疗水平的提高，患者及家庭经济实力的改善。本研究用于移植的137份脐血，60．6％冻存时间( 血采集日期至移植日期)在2年以下，对冻存 2年以下及2年以上的脐血复苏后细胞活力及UCBT造血重建时间、植入失败率、急性 GVHD发生率、TRM进行比较，结果提示，冻存时间长短对细胞活力、移植预后无显著影响。黄璐等研究了20份液氮深低温保存1～20年的脐血标本，结果提示，冻存的降温和复苏过程会造成细胞数量下降，但移植效果不受影响。国外有学者提出，复苏后活细胞比例下降，主要是分化成 熟细胞的丢失，因此不影响造血干细胞的植入。
综上所述，USCT已被广泛应用 于多种疾病的治疗。近两年来，UCBT临床疗效有明显改善，小于16岁的患者 比成人预后更好。脐血冻存时间对复苏后细胞活力、移植的预后无显著影响。
摘自：
中华血液学杂志 2015年 2月第 36卷第 2期 ChinJHematol，February2015，Vo1．36，No 2
参考文献：[1]GlucksbergH，StorbR，FeferA，eta1．Clinicalmanifestationsof
graft-versus·-hostdiseasein human recipientsofmarow from
HL-A—matchedsiblingdonors[J]．Transplantation，197418(4)：
295—304．
